又黄又爽又刺激的视频I热久久国产Iwww.91爱爱.comI??观看吃奶一久久两性/欧美激情免费观…I男男视频网站I天天搞天天I国产在线精品区I你懂的电影在线I91精品在线观看入口I免费在线播放avI日韩国产一区I99paoI在线播放 你懂的I干亚洲无码I国产分类视频I成人h电影I99re热免费精品视频I亚洲BB

咨詢熱線

400-028-6680

當前位置:首頁  >  技術文章  >  蜀科臺式低速離心機制備大腸桿菌感受態細胞

蜀科臺式低速離心機制備大腸桿菌感受態細胞

更新時間:2017-08-01      點擊次數:5582

  蜀科臺式低速離心機操作簡單、運行平衡、性能穩定、安全可靠,廣泛應用于,放射免疫、生物化學、食品衛生、環保等科研領域。今天來科普一下如何用蜀科臺式低速離心機制備大腸桿菌感受態細胞,給各位實驗室的朋友參考。
 

1.先將受體大腸桿菌接種于LB培養基中活化,置于恒溫培養箱中37℃培養過夜。。。

2.接著取一丁點(槍頭沾一下)上述大腸桿菌培養物菌落接種于3-5毫升LB試管中,于恒溫振蕩器上,37℃振蕩培養過夜(約12-16 小時)。

4.再是用移液管無菌條件下,取過夜培養液1 毫升,接種于新鮮的LB 中(100毫升LB/250毫升三角瓶,接種量按菌液濃度而定,一般在1%左右),于恒溫振蕩器上37℃培養2―3 小時。

5.無菌條件下將上述1 毫升菌液倒入1.5毫升EP 管中(離心管應帶蓋并高壓滅菌過),每組2支。

6、帶菌液的離心管置于冰上10 分鐘,冷卻菌液,平衡好,置于蜀科臺式低速離心機上,3500r/min 離心5 分鐘。

7、無菌條件下,倒去上清LB,倒斜離心管,讓LB 流干,留下沉淀菌體,加入預冷的100mmol/L CaCl2溶液600微升,用微量取樣器輕輕吸沖底部沉淀菌體,使其懸浮后,把2支管轉為1支,搖勻后于冰浴中放置30分鐘。

8、重新將CaCl2 菌懸浮液置于蜀科臺式低速離心機上,3500r/min離心10分鐘,小心側倒掉上清CaCl2 ,留沉淀菌體。

9、再把菌體懸浮在200 微升100mmol/L CaCl2 的溶液中,置于冰上作為轉化的受體菌液。此制備的感受態細胞應在此步后1小時24小時內使用,效率比較高。

10.在事先制備好的含50μg/ml Amp的LB 平板表面加40ml X-gal 儲液和4μl IPTG儲液,用無菌玻棒將溶液涂勻,置于37℃下放置3-4小時,使培養基表面的液體*被吸收,備用。

 

  上面的應用對大家有幫助嗎?操作中的蜀科TD-5Z臺式低速離心機榮獲2016“國產好儀器”殊榮,是國內各大實驗室、、生物科技、食品環保等單位*的儀器。如果您也有需要,趕快吧!

聯系我們

四川蜀科儀器有限公司 公司地址:四川省成都市溫江區海旺路99號5號樓   技術支持:化工儀器網
  • 聯系人:曾先生
  • QQ:599353114
  • 公司傳真:028-61985396
  • 郵箱:shuke@sklxj.com

掃一掃 更多精彩

微信二維碼

主站蜘蛛池模板: 河南省| 巴林左旗| 景洪市| 贡山| 阿坝县| 咸阳市| 兴义市| 麦盖提县| 武山县| 花莲市| 石首市| 陆良县| 巩留县| 凤城市| 土默特左旗| 定安县| 永福县| 吉首市| 沂南县| 淳化县| 云安县| 宝山区| 辰溪县| 石台县| 定西市| 乌审旗| 长寿区| 贵德县| 四子王旗| 沛县| 新沂市| 肥东县| 上杭县| 合肥市| 文成县| 百色市| 丹寨县| 宜宾县| 琼海市| 陆川县| 枞阳县|